细胞传代培养消化法

细胞传代培养消化法

准备：1、预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37摄氏度水浴锅内预热。
2、用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
3、正确摆放使用的器械：保证足够的操作空间，不仅便于操作而且可减少污染。
4、点燃酒精灯：注意火焰不能太小。
5、准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。
6、去除预热好的培养用液：取出已经预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
7、从培养箱内取出细胞：注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。
细胞传代8、打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。

胰蛋白酶消化：
1、加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS冲洗，加入适量胰蛋白酶液，注意消化液的量以盖住细胞，*消化温度是37摄氏度。
2、显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度。
3、吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。

吹打分散细胞：
1、吹打制悬
2、吸细胞悬液入离心管
3、平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中以1000转/分钟离心6-8分钟。
4、弃上清液，加入新培养液。

分装稀释细胞：
1、分装
细胞传代2、显微镜下观察细胞

继续培养：
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细胞库细胞索引（部分）

人胚肺成纤维细胞，MRC-5  
人胚肺成纤维细胞，CCC-HPF-1  
人胚胎气管组织来源细胞，CCC-HBE-2  
人胚胎肺成纤维细胞，WI-38  
SV-40Z转化肺成纤维细胞，WI38/VA13  
人胚肺二倍体细胞，2BS  
人胚肺二倍体细胞，KMB-17  
人肺细胞，HLF-a  
人小细胞肺癌细胞，DMS 153  
人胚肺细胞 VA13细胞，WI-38 VA13亚系 2RA  
人胚肺二倍体细胞，HEL-1  
人胚肺细胞系，KuMA  
人肺转化细胞系，AE1201  
细胞传代  
人胚肺二倍体细胞，HEL-2  
人支气管上皮样细胞，BEAS-2B  
人胚肺转化细胞，SL-1  
人肺腺癌细胞，Calu-3  
人小细胞肺癌细胞，NCI-H209  
人低分化肺腺癌细胞，GLC-82  
人小细胞肺癌细胞，NCI-H446  
人非小细胞肺腺癌细胞，NCI-H157  
人肺鳞癌细胞，NCI-H520  
人肺巨细胞癌高转移细胞株，PG-BE1  
人肺巨细胞癌低转移细胞株，PG-LH7  
人肺癌细胞，A-427  
人低分化肺腺癌细胞，SK-LU-1  
人肺支气管癌细胞，NCI-H1650  
人非小细胞肺腺癌细胞，NCI-H1975  
人非小细胞肺腺癌细胞，NCI-H2087  
人小细胞肺癌细胞，NCI-H2227  
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H23  
人肺腺鳞癌细胞，NCI-H596  
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H838  
人肺鳞癌细胞，LTEP-s  
人小细胞肺癌细胞，LTEP-sm  
人肺鳞癌瘤株，LTEP-s  
人肺鳞癌细胞，NCI-H1703 

 
人肺鳞癌细胞，NCI-H2170  
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H524  
人肺腺癌细胞，SPC-A1  
人肺癌细胞，A549  

人非小细胞肺癌细胞，H125  
人肺癌细胞，H1299  
人肺癌细胞，TKB-1  
人肺腺癌细胞，LTEP-a-2  
人肺腺癌细胞，Lu-165  
人大细胞肺癌细胞，NCI-H460  
人肺腺癌细胞，SPC-A-1  
人高转移肺癌细胞，95-D  
人肺鳞癌细胞，SK-MES-1  
人大细胞肺癌细胞，NCI-H661  
人肺黏液上皮样癌细胞，NCI-H292  
人肺退行性癌细胞，Calu-6  
人肺腺癌细胞，NCI-H1395  
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H358  
人非小细胞肺癌细胞，HCC827  
人典型小细胞肺癌细胞，NCI-H1688  
人非小细胞肺癌细胞，NCI-H1299    ..

菌种库名称检索（部分）

 青春双歧杆菌 ATCC 15703
黑曲霉 ATCC 16404
恶臭假单胞菌 ATCC 17485
单增李斯特氏菌 ATCC 19111
溶组织梭菌Clostridium histolyticum  ATCC 19401
生孢梭菌 ATCC 19404
破伤风杆菌/梭菌Clostridium tetani  ATCC 19406
化脓性链球菌 ATCC 19615
黄杆菌属 ATCC 21047
近平滑念珠菌 ATCC 22019
变异链球菌 ATCC 25175
脆弱拟杆菌 ATCC 25285
洋葱假单胞菌 ATCC 25416
大肠埃希氏菌 ATCC 25922
金黄色葡萄球菌 ATCC 25923
宋内氏志贺氏菌（Sh.sonnei） ATCC 25931
金黄色葡萄球菌 ATCC 27217
创伤弧菌 ATCC 27562
铜绿假单胞杆菌（绿脓杆菌） ATCC 27853
粪肠球菌 ATCC 29212
金黄色葡萄球菌 ATCC 29213
两歧双歧杆菌 ATCC 29521
多形拟杆菌 ATCC 29741
粪肠球菌 ATCC 33186
空肠弯曲菌 ATCC 33291
金黄色葡萄球菌 ATCC 33591
大肠埃希氏菌 ATCC 35218
屎肠球菌 ATCC 35667
变异链球菌 ATCC 35668
迟缓真杆菌/迟缓埃格特菌 ATCC 43055
金黄色葡萄球菌 ATCC 43300
弗氏柠檬酸杆菌 ATCC 43864
淋病柰瑟氏菌 ATCC 49226
流感嗜血杆菌 ATCC 49247
肺炎链球菌 ATCC 49619
流感嗜血杆菌 ATCC 49766
粪肠球菌（高耐） ATCC 51299
阪崎肠杆菌  ATCC 51329
克柔念珠菌 ATCC 6258
金黄色葡萄球菌 ATCC 6538
枯草芽孢杆菌 ATCC 6633
肺炎克雷伯菌 ATCC 700603
热带念珠菌 ATCC 750
嗜热脂肪地芽孢杆菌 ATCC 7953
植物乳杆菌 ATCC 8014
大肠埃希氏菌 ATCC 8739
白色假丝酵母/白色念球菌 ATCC 90029
铜绿假单胞杆菌（绿脓杆菌） ATCC 9027
枯草芽孢杆菌黑色变种 ATCC 9372
艰难梭菌Clostridium difficile  ATCC 9689
啤酒酵母 ATCC 9763
黑曲霉  ATCC 10582
砖红链霉菌  ATCC19776
白色葡萄球菌  ATCC8799
皱褶青霉 ATCC 10128
黑曲霉 ATCC 10864
酿酒酵母 ATCC 26603
酿酒酵母 ATCC 26785
运动发酵单孢菌 ATCC 29191
假单胞杆菌 ATCC 31554
粪产碱杆菌 ATCC 31555
菅囊酵母 ATCC 32691
弗氏柠檬酸杆菌 ATCC10787
荚膜红细菌 ATCC11166
发根土壤杆菌（发根植物单胞菌） ATCC11325
生孢梭菌（产芽孢梭状芽孢杆菌） ATCC11437
痤疮丙酸杆菌 ATCC11827
地衣芽孢杆菌 ATCC11946
谷氨酸棒杆菌 ATCC13032
熏衣草灰链霉菌 ATCC13306
猪霍乱沙门氏菌猪霍乱亚种 ATCC13312
脱氮假单胞菌 ATCC13867
耐放射异常球菌 ATCC13939
绿针假单胞菌 ATCC13985
肠炎沙门氏菌肠炎亚种 ATCC14028

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