通过 VIDEODROP 评估 LNP 浓度示例分析
通过 VIDEODROP 评估 LNP 浓度示例分析
使用 VIDEODROP 进行 LNP 分析
VIDEODROP 是一种基于干涉原理的创新纳米级成像技术,能够在短时间内以高重复性测量纳米颗粒的尺寸和浓度。
OneDrop & OneClick 实时测量
高再现性最大限度地减少测量仪之间的误差
按原样测量未纯化和未标记的样品
粒径、分散状态、zeta 电位等是核酸药物评价中的重要理化参数,但使用 VIDEODROP 的单颗粒测量技术监测颗粒浓度使其变得不那么复杂,可以收集数据以帮助标准化质量控制,在执行测定步骤之前进行稳定性评估和比较研究,并在新配方开发、制造工艺和储存条件中有效比较颗粒计数。
因此,我们将使用VIDEODROP来比较不同条件下mRNA-LNP颗粒的数量,并重点介绍过程或脂膜成分对转染活性的影响的测量结果。
图 1. VIDEODROP 如何用于 mRNA-LNP 生产的图片
LNP 颗粒浓度很重要的过程
使用 mRNA-LNP 制造纳米药物时需要评估多个项目。
在这里,我们将针对以下四点检查 VIDEODROP 测量和流式细胞仪对不同制造条件的样品的测量:(1)用于合成 LNP 的试剂类型,(2)混合 LNP 和 RNA 的速度,(3)损失由于缓冲液更换,以及(4)由于储存条件造成的损失,我们比较了所使用的核酸递送测定的结果,并评估了每个步骤中浓度测量的重要性。
分析结果 颗粒浓度是否影响转染活性?
脂质成分的优化
在该实验中,使用相同的工艺制造了两种具有不同脂质成分的LNP,并对每个样品进行了测量。
颗粒浓度不受脂质组合物的影响,但脂质组合物 1 与脂质组合物 2 相比显示出更高的活性。尽管颗粒数量几乎相同,脂质组合物1比脂质组合物2更有效。
混合速度优化
在这里,作为混合速度的优化评估,我们通过改变微流体装置上的混合速度(流速)从 2 到 18 mL/min 来比较 LNP 的浓度和转染活性。
尽管 LNP 本身的组成相同,但改变混合速度对颗粒浓度和转染活性有显着影响。它与粒子数有直接关系。
优化缓冲液交换
使用切向流过滤(TFF)的缓冲液交换和浓缩步骤用于将用于LNP合成的缓冲液替换为用于施用的缓冲液,并增加制剂的浓度并提高效价这是LNP合成中的重要步骤。
在这种情况下,缓冲液交换步骤中的颗粒数量减少了 75%,证实需要优化 TFF 流程。
存储优化
优化储存条件对于确保产品质量至关重要。在本实验中,我们测量了储存在 +4°C 或 -20°C 下的相同 mRNA-LNP。
测量结果表明,与+4°C条件相比,-20°C储存导致活性下降和颗粒数量减少。
结论
Videodrop 是一款即用型工具,只需一滴即可测量 LNP 颗粒浓度和颗粒尺寸分布。
Videodro 可让您快速轻松地测量浓度,从而更好地控制制造过程。
使用纳米颗粒计数标准化基于细胞的测定(转染活性)可改善比较研究中不同条件下产生的 LNP 的评估
VIDEODROP是完成评估LNP质量的分析策略的理想工具。
免责声明
- 凡本网注明“来源:化工仪器网”的所有作品,均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品,未经本网授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的,应在授权范围内使用,并注明“来源:化工仪器网”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
- 本网转载并注明自其他来源(非化工仪器网)的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品第一来源,并自负版权等法律责任。
- 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。