鸡白细胞介素6（IL-6）酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：                                                          96T

1 ng/L -40 ng/L

使用目的：

本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素6（IL-6）含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡白细胞介素6（IL-6）水平。用纯化的鸡白细胞介素6（IL-6）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素6（IL-6），再与HRP标记的白细胞介素6（IL-6）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素6（IL-6）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡白细胞介素6（IL-6）浓度。

试剂盒组成

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

1. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
2. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 
3. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
4. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
5. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
6. 温育：操作同3。
7. 洗涤：操作同5。
8. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
9. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
10. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

操作程序总结：

计算

  以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

1. 请每次测定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。
2. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

保存条件及有效期

1．试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月

RC-0485R Anti-EphA2 R（Ephrin A2 Receptor）  酪氨酸蛋白激酶受体A2抗体
RC-0247R Anti-EphB2 R （Ephrin B2 Receptor）  酪氨酸蛋白激酶受体B2抗体
RC-0725R Anti-ER  雌激素受体
RC-0021M Anti-ERAB  内质网Aβ相关结合蛋白抗体
RC-0022R Anti-ERK2/ERK （MAPK-1/2,MAPK-α ，ERK2，MAPK1，MAPK2, p42MAPK）  丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体
RC-1020R Anti-MAPK1/ERK3 （Mitogen-activated protein kinase 3; P44MAPK）  丝裂原活化蛋白激酶3抗体
RC-0122R Anti-ER-α（Estrogen）  雌激素受体抗体
RC-0254R Anti-ER-α（Estrogen）  雌激素受体α抗体
RC-0174R Anti-ER-α/β Estrpgen Receptor α/β  雌激素受体α/β抗体
RC-0116R Anti-ER-β （Estrogen receptor-β）  雌激素受体β 抗体
RC-0254R Anti-ER-β （Estrogen receptor-β）  雌激素受体抗体
RC-0593R Anti-ESA （Epithelial Specific Antigen）  上皮特异性抗原抗体
RC-0188R Anti-ET-1 （Endothelin-1）  内皮素-1抗体
RC-0202R Anti-ET-1（Endothelin-1）  内皮素-1抗体
RC-1285R anti-ets1/E26 （E-twenty six 1）   Ets转录因子家族ets1抗体
RC-0613R Anti-Eukaryotic aspartyl protease（Rice）  天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗体（水稻蛋白的一种）
RC-0852R Anti-EV71（Human enterovirus 71）  肠道病毒71型/手足口病病毒抗体
RC-0243R Anti-EXPB-2（beta-expansin）death inducer-obliterator-2  植物延展素-β
RC-0788R Anti-Fabp2 （fatty acid binding protein 2, intestinal）  脂肪酸结合蛋白2抗体
RC-0386R Anti-FABP（brain） （Fatty acid-binding protein brain）  脑型脂肪酸结合蛋白抗体
RC-0332R Anti-factor VIII（FVIII）  第八因子相关抗原抗体
RC-0434R Anti-factor VIII（FVIII）  第八因子相关抗原抗体
RC-0511R Anti-FADD （Fas-associated protein with death domain）  Fas死亡结构域相关蛋白
RC-0711R Anti-FAM3B/PANDER（PANcreatic DERived factor）  胰腺衍生因子抗体
RC-0215R Anti-FAS/Apo-a1/CD95（TNFR superfamily member;FasL receptor）（mouse rat）  载脂蛋白A1抗体
RC-0849R Anti-Apo-a1/apoA1 （Apolipoprotein A-1; APOA1 protein ）human  载脂蛋白A1抗体
RC-0216R Anti-FasLAnti-FasL  FasL抗体
RC-1157R Anti-FBN1 （fibrillin 1）  原纤维蛋白1抗体
RC-0110R Anti-Fe65 protein  Fe65 蛋白抗体
RC-0229R Anti-FGF1/aFGF/ECGF-beta/HBGF-1  肝素结合生长因子/酸性成纤维细胞生长因子抗体
RC-1255R Anti-FGF3/Oncogene INT2（Fibroblast Growth Factor3）  纤维母细胞生长因子3抗体
RC-1256R Anti-FGF3/HSTF1/HBGF-4（Fibroblast Growth Factor4）  纤维母细胞生长因子4抗体
RC-1257R Anti-FGF5（Fibroblast Growth Factor 4）  纤维母细胞生长因子5抗体
RC-0734R Anti- KGF/FGF-7（Keratinocyte growth factor precursor）  角质形成细胞生长因子受体/纤维母细胞生长因子-7抗体
RC-0735R Anti-FGF-8/HBGF-8 （Fibroblast growth factor 8）  成纤维细胞生长因子-8/纤维母细胞生长因子-8抗体
RC-1326R anti-FGF-10（Fibroblast Growth Factor-10）  成纤维细胞生长因子-10/纤维母细胞生长因子-10抗体
RC-1323R Anti-KGFR（kilodalton growth factor receptors）  角质形成细胞生长因子受体抗体
RC-0230R Anti-FGFR1（Fibroblast Growth Factor Receptor 1）  纤维母细胞生长因子受体1抗体
RC-0675R Anti-FGFR2（Fibroblast Growth Factor Receptor 2）  成纤维细胞生长因子受体2抗体
RC-1301R Anti-FGFR3（Fibroblast Growth Factor Receptor 3）  成纤维细胞生长因子受体3抗体
RC-0676R Anti-FGFR4（Fibroblast Growth Factor Receptor 4）  成纤维细胞生长因子受体4抗体
RC-0315R Anti-fgl2 （Fibrinogen-like 2）  凝血酶原酶抗体/纤维介素蛋白/前凝血素抗体
RC-0809R anti-Fibulin 1  抗“衰老关键蛋白”抗体
RC-0810R Anti-Fibulin-5  抗“衰老关键蛋白”抗体
RC-0119R Anti-FLIP S/L （Flice-like Inhibitory Protein）  凋亡调节基因之一抗体
RC-1120R Anti-FLIPS （Flice-like Inhibitory Protein S）  凋亡调节基因之一抗体（短型）